Perbandingan Antibodi Monoklonal dan Poliklonal

INIRUMAHPINTAR.COM - Bagaimana Perbandingan antara Antibodi Monoklonal dan Poliklonal? Yang manakah di antara keduanya yang memiliki keefektifan? Secara garis besar, perlu diketahui bahwa antibodi poliklonal adalah kelompok antibodi yang mampu mengidentifikasi banyak epitop yang berbeda dari antigen tertentu. Antibodi yang berasal dari seleksi sel B, masing-masing mengenali satu epitop tertentu. Sementara itu, antibodi monoklonal memiliki satu sumber tunggal. Antibodi poliklonal mudah disimpan, berikatan lebih cepat dengan antigen yang bersangkutan, dan memberikan perlindungan yang lebih kuat ketika mengidentifikasi dan menangani epitop spesifik.

Apakah Antibodi Poliklonal Sama Efektifnya dengan Antibodi Monoklonal?

Antibodi poliklonal mampu berkinerja lebih baik dalam situasi tertentu daripada antibodi monoklonal. Karena poliklonal memiliki kemampuan untuk melekat pada lebih dari satu antigen, mereka dapat memperluas sinyal yang dikeluarkan oleh target meskipun intensitasnya sangat rendah. Ketika berhadapan dengan immunoprecipitation kromatin, antibodi poliklonal bekerja paling baik karena mereka memiliki area target yang lebih luas dan dapat mengambil bahkan resonansi terendah ketika bermuara ke ekspresi jenis protein tertentu. Salah satu manfaat utama dari antibodi poliklonal adalah bahwa ia sangat toleran terhadap banyak perubahan yang pada akhirnya akan menyebabkan masalah dengan antibodi monoklonal.

Banyak laboratorium penelitian lebih memilih penggunaan antibodi poliklonal karena berbagai alasan. Mereka lebih keras daripada jenis antibodi lain dan dapat menahan lebih banyak gangguan atau perubahan dalam antigen. Mereka dapat bertahan dengan kondisi yang lebih keras dan lingkungan yang lebih beragam. Poliklonal juga sangat murah dan mudah dibuat. Karena dalam mengembangkan poliklonal, para peneliti tidak perlu memiliki jenis pelatihan yang ekstensif atau teknologi yang sangat canggih untuk melakukan tes.

Apa Kelemahan Antibodi Poliklonal?

Antibodi monoklonal dapat dipanen atau diproduksi tanpa batas, tidak seperti antibodi poliklonal yang mungkin hanya dapat diperoleh untuk waktu yang singkat. Antibodi poliklonal juga membutuhkan banyak hewan berbeda untuk menghasilkan satu produk. Antibodi ini tidak dapat terus diturunkan dari sumber yang sama, yang artinya mereka tidak selalu persis sama. Ketika penelitian sedang dilakukan pada hewan uji, kebutuhan untuk antibodi poliklonal untuk menjadi seakurat mungkin adalah suatu keharusan jika tes harus konklusif dan akurat.

Kelemahan terbesar dari antibodi poliklonal adalah bahwa sumbernya terbatas. Monoklonal memiliki apa yang disebut sebagai sumber abadi atau tidak pernah berakhir. Poliklonal tidak menghasilkan hasil yang sama dengan antibodi monoklonal. Monoklonal memiliki efek pewarnaan rendah, sehingga mudah bereaksi dengan protein lain. Sedangkan poliklonal, di sisi lain, dapat memiliki peningkatan reaksi silang yang dapat memiliki dampak dramatis pada hasil tes. Karena poliklonal mengenali beberapa epitop antigen, mereka tidak ideal digunakan ketika antigen tunggal adalah target.

Di laboratorium penelitian, sebagian besar peneliti akan memilih poliklonal hanya karena biaya pengadaannya lebih efektif dan sangat mudah digunakan. Laboratorium tidak perlu berteknologi maju untuk menciptakan antibodi poliklonal. Kemampuan mereka mendeteksi berbagai antigen membuat mereka mudah digunakan untuk banyak tes. Selain itu, kemampuan untuk menahan perubahan dalam antigen membuatnya menjadi pilihan yang jauh lebih baik daripada antibodi monoklonal. Perubahan seperti polimorfisme dan denaturisasi dapat memiliki dampak dramatis pada hasil tes tertentu. Antibodi poliklonal menolak perubahan ini dan memungkinkan tes untuk menghasilkan hasil yang lebih akurat dan ringkas. Peneliti dapat melakukan tes yang mereka butuhkan, sementara tidak perlu merencanakan anggaran yang besar.

Berikut perbandingan Fakta, Kelebihan, dan Kelemahan antara antibodi monoklonal dan poliklonal secara detail.

Antibodi monoklonal

Fakta:

Spesifisitas tinggi: hanya mendeteksi satu epitop pada antigen.
Terdiri dari hanya satu subtipe antibodi (misalnya IgG1, IgG2, IgG3).
Dalam memproduksi antibodi diperlukan pelatihan untuk teknologi yang digunakan.
Jangka waktu yang lama untuk produksi hibridoma.

Keuntungan:

Hybridomas adalah sumber konstan dan terbarukan yang pernah dibuat, dan semua batch akan identik, meningkatkan konsistensi dan standarisasi prosedur dan hasil eksperimen. Monoklonal mendeteksi satu epitop per antigen. Ini memiliki keuntungan sebagai berikut:

Latar belakang rendah dari pewarnaan bagian dan sel sehingga secara khusus mendeteksi satu target epitop berarti mereka cenderung bereaksi silang dengan protein lain.
Homogenitas antibodi monoklonal tinggi. Jika kondisi percobaan dijaga konstan, hasil dari antibodi monoklonal dapat sangat mudah direproduksi dalam eksperimen.
Spesifisitas tinggi membuat mereka efisien untuk pengikatan antigen dalam campuran molekul terkait, seperti selama pemurnian afinitas.

Kekurangan:

Mungkin terlalu spesifik untuk dideteksi di berbagai spesies.
Lebih rentan terhadap hilangnya epitop melalui pengobatan kimia antigen daripada antibodi poliklonal. Ini dapat diimbangi dengan menyatukan dua atau lebih antibodi monoklonal ke antigen yang sama (misalnya antibodi koktil)

Antibodi Poliklonal

Fakta:

Mengenali beberapa epitop pada salah satu antigen. Serum yang diperoleh akan mengandung campuran antibodi kompleks heterogen dari afinitas yang berbeda.
Poliklonal terdiri terutama dari subclass IgG.
Imunogen peptida sering digunakan untuk menghasilkan antibodi poliklonal yang menargetkan epitop unik, terutama untuk keluarga protein homologi tinggi.
Produksi antibodi: a) Murah dan relatif cepat untuk diproduksi. b) Produksi kurang kompleks dibandingkan dengan antibodi monoklonal.

Keuntungan:

Antibodi poliklonal mengenali beberapa epitop pada salah satu antigen sehingga memiliki keuntungan sebagai berikut:

Afinitas tinggi: poliklonal memperkuat sinyal dari protein target dengan tingkat ekspresi rendah, karena protein target akan mengikat lebih dari satu molekul antibodi pada epitop ganda. Namun, ini kurang menguntungkan untuk eksperimen kuantifikasi (misalnya dalam aliran cytometry) karena menghasilkan hasil yang tidak akurat.
Lebih toleran terhadap perubahan antigen minor (misalnya polimorfisme, heterogenitas glikosilasi atau sedikit denaturasi) daripada monoklonal.
Dapat mengidentifikasi protein dari homologi tinggi ke protein imunogen, dan dapat digunakan untuk menyaring protein target pada spesies selain dari imunogen.
Seringkali dijadikan pilihan terbaik untuk mendeteksi protein yang didenaturasi.

Kekurangan:

Rawan variabilitas batch-ke-batch.
Beberapa epitop membutuhkan pemeriksaan urutan imunogen untuk reaktivitas silang.
Kurang berguna untuk menyelidiki domain spesifik antigen karena antiserum biasanya akan mengenali banyak domain.

Nah, seperti itulah perbandingan lengkap antara Antibodi Monoklonal dan Poliklonal. Semoga mencerahkan!